本文已被：浏览 439次 下载 403次
投稿时间：2024-01-10
投稿时间：2024-01-10
中文摘要: 为可视化检测海产品中的活副溶血性弧菌，该研究将叠氮溴化丙锭（propidium monoazide，PMA）染料与跨越式滚环等温扩增（saltatory rolling circle amplification，SRCA）技术相结合，以toxR 为靶基因，设计并筛选引物，成功建立可视化PMA-SRCA 检测方法，并评估所建立的方法。研究表明，12 株副溶血性弧菌样品呈现阳性，29 株非副溶血性弧菌样品呈现阴性，表明该方法特异性良好。该方法灵敏度为3.2×100 CFU/mL，高于可视化PMA-环介导等温扩增（3.2×101 CFU/mL）和可视化PMA-聚合酶链式反应（3.2×102 CFU/mL）的灵敏度。对76 份市售海鲜样品进行检测，该方法的敏感性为100.00%，特异性为92.00%，符合率为97.37%。综上所述，可视化PMA-SRCA 检测方法可检测活的副溶血性弧菌，具有良好的特异性、较优异的灵敏度。
Abstract:To visually detect viable Vibrio parahaemolyticus in seafood，this study employed the propidium monoazide（PMA）dye in conjunction with saltatory rolling circle amplification（SRCA）technology.The primers were designed and screened targeting the toxR gene.The PMA-SRCA visual detection method was successfully established and evaluated. The results showed that 12 Vibrio parahaemolyticus samples were positive and 29 non-Vibrio parahaemolyticus samples were negative，indicating that the method has good specificity. Moreover，this method displayed a sensitivity of 3.2×100 CFU/mL，higher than that of both visual PMA-LAMP（3.2×101 CFU/mL）and visual PMA-PCR（3.2×102 CFU/mL）. In the detection of 76 seafood samples in total，this method achieved a sensitivity，specificity，and coincidence rate of 100.00%，92.00%，and 97.37%，respectively. In conclusion，the PMA-SRCA visual detection method exhibits exceptional specificity and remarkable sensitivity in detecting viable Vibrio parahaemolyticus.
keywords: saltatory rolling circle amplification Vibrio parahaemolyticus propidium monoazide visualization detection
文章编号：202418025 中图分类号： 文献标志码：
基金项目:国家自然科学基金项目（32172288、31371772）；河北省自然科学基金重点项目（C2019204342）；中央引导地方科技发展资金项目（216Z5501G、226Z5503G、236Z5502G）；河北省外专百人计划（360-0803-JSN-3YGS）；河北农业大学食品加工学科群经费资助（2021-06）；河北省博士后科研项目（B2021005007）；河北省重点研究开发计划项目（18275501D）；河北省教育厅科研项目（QN2022073）；河北省自然科学基金项目（C2019204284）；河北省自然科学基金生物农业联合基金项目（C2023204200、C2023204241）
引用文本：
津ICP备20000603号-1