本文已被：浏览 3131次 下载 2304次
投稿时间：2022-07-17
投稿时间：2022-07-17
中文摘要: 对谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum，C.glutamicum）表达大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）来源海藻糖酶进行研究。构建重组C.glutamicum菌株Cgtrl表达E.coli BL21来源海藻糖酶。菌株Cgtrl海藻糖酶最适表达条件：诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG）添加量为0.5 mmol/L，诱导温度为22℃，诱导时间为12 h。在最适表达条件下重组海藻糖酶酶活为9.1 U/mL。重组海藻糖酶酶学性质研究表明，未经纯化的重组海藻糖酶具有较好的底物特异性能，专一性水解海藻糖，海藻糖水解率在96%以上，低温条件下稳定性较好，能够长时间低温保存，最适作用温度为45℃，最适作用pH值为6.6。
Abstract:The expression of trehalase from Escherichia coli BL21 by the constructed recombinant Corynebacterium glutamicum was studied.The optimal conditions for trehalase expression by Cgtrl were 0.5 mmol/L of isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside as the inducer，induction temperature of 22 ℃，and induction time of 12 h.The recombinant trehalase activity reached 9.1 U/mL under the optimal expression conditions.Unpurified recombinant trehalase specifically hydrolyzed trehalose.The hydrolysis ratio of trehalose exceeded 96%.The recombinant trehalase was stable and could maintain enzyme activity for a long period at low temperature.The enzyme activity was optimal at 45℃and pH 6.6.
keywords: Corynebacterium glutamicum Escherichia coli trehalase optimization of expression conditions enzymatic properties
文章编号：202224025 中图分类号： 文献标志码：
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目（31700075）；山东省重大科技创新工程项目（2019JZZY020605）
引用文本：
津ICP备20000603号-1